Амидаза (AMD)
Ензими:Са макромолекулни биологични катализатори, повечето ензими са протеини
Амидаза:Катализират хидролизата на различни ендогенни и чужди алифатни и ароматни амиди чрез прехвърляне на ацилна група към вода с производството на свободни киселини и амоняк. Хидроксамовите киселини и други органични киселини се използват широко като лекарства, тъй като са съставки на растежни фактори, антибиотици и туморни инхибитори. Амидазите могат да бъдат разделени на ацилази от R тип и S тип според стереоселективността на катализатора.
В допълнение към катализирането на хидролизата на амиди, амидазата може също да катализира реакции на ацил трансфер в присъствието на ко-субстрати като хидроксиламин.
Амидазите с различни източници имат различна субстратна специфичност, някои от тях могат да хидролизират само ароматни амиди, други - само алифатни амиди, а трети - α- или ω-амино амиди. Повечето амини имат добра каталитична активност само за ациклични или прости ароматни амиди, но за сложни ароматни съединения, хетероцикличните амиди, особено амидите с орто заместители, обикновено са с ниска активност (само няколко ензима проявяват по-добри каталитични ефекти).
Каталитичен механизъм:
| Ензими | Код на продукта | Код на продукта |
| Ензимен прах | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | комплект от 19 амидази, по 50 мг всяка 19 артикула * 50 мг / артикул или друго количество |
| Комплект за скрининг (SynKit) | ES-AMD-1900 | комплект от 19 амидази, по 1 mg всяка 19 артикула * 1 mg / артикул |
★ Висока субстратна специфичност.
★ Силна хирална селективност.
★ Висока ефективност на преобразуване.
★ По-малко странични продукти.
★ Условия на лека реакция.
★ Екологично чист.
➢ Скринингът на ензими трябва да се извършва за специфични субстрати поради специфичността на субстрата и да се избере ензим, който катализира целевия субстрат с най-добър каталитичен ефект.
➢ Никога не допускайте контакт с екстремни условия, като например: висока температура, високо/ниско pH и органични разтворители с висока концентрация.
➢ Обикновено реакционната система трябва да включва субстрат, буферен разтвор (оптималното pH на реакцията на ензима). Ко-субстрати като хидроксиламин трябва да присъстват в реакционната система за ацил трансфер.
➢ AMD трябва да се добавя последен в реакционната система с оптимално pH и температура на реакцията.
➢ Всички видове AMD имат различни оптимални условия на реакция, така че всеки от тях трябва да бъде допълнително проучен поотделно.
Пример 1(1):
Хидролизна активност към различни амидни субстрати
| Субстрат | Специфична дейност μmol min-1mg-1 | Субстрат | Специфична дейност μmol min-1mg-1 |
| Ацетамид | 3.8 | ο-ОН бензамид | 1.4 |
| Пропионамид | 3.9 | p-ОН бензамид | 1.2 |
| Лактамид | 12.8 | ο-NH2бензамид | 1.0 |
| Бутирамид | 11.9 | p-NH2бензамид | 0.8 |
| Изобутирамид | 26.2 | ο-Толуамид | 0.3 |
| Пентанамид | 22.0 | p-Толуамид | 8.1 |
| Хексанамид | 6.4 | Никотинамид | 1.7 |
| Циклохексанамид | 19.5 | Изоникотинамид | 1.8 |
| Акриламид | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
| Метакриламид | 3.5 | 3-фенилпропионамид | 7.6 |
| Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1.9 |
| Бензамид | 6.8 |
Реакцията се провежда в 50 mM буферен разтвор на натриев фосфат, pH 7,5, при 70 ℃.
| Амиди | Хидроксиламин | Хидразин |
| Ацетамид | 8.4 | 1.4 |
| Пропионамид | 18.4 | 3.0 |
| Изобутирамид | 25.0 | 22.7 |
| Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Реакцията се провежда в 50 mM буферен разтвор на натриев фосфат, pH 7,5, при 70 ℃.
Свързана концентрация на реагенти: амиди, 100 mM (бензамид, 10 mM); хидроксиламин и хидразин, 400 mM; ензим 0,9 μM.
Пример 2(2):
Пример 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Екстремофили, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR и др. Процесна биохимия, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM и др. Биоорганична химия, 2017, Достъпно онлайн 7.
